【lowry法是什么】Lowry法是一种用于测定蛋白质含量的经典化学分析方法，因其高灵敏度和良好的重复性，被广泛应用于生物化学、分子生物学及临床医学等领域。该方法由Oliver H. Lowry等人于1951年首次提出，是基于双缩脲反应与福林酚（Folin-Ciocalteu）试剂的显色反应相结合的一种比色法。
一、Lowry法的基本原理
Lowry法的核心原理是通过两个步骤进行蛋白质的定量：
1. 双缩脲反应：在碱性条件下，蛋白质中的肽键与铜离子形成紫色络合物。
2. 福林酚反应：福林酚试剂与络合物中的酪氨酸、色氨酸和半胱氨酸等芳香族氨基酸发生氧化还原反应，生成蓝色物质。
最终生成的蓝色物质在750 nm波长下有最大吸收峰，通过分光光度计测得吸光度，即可计算出蛋白质浓度。
二、Lowry法的优点与缺点
| 优点 | 缺点 |
| 灵敏度较高，可检测微克级蛋白质 | 对某些干扰物质敏感，如去垢剂、还原剂等 |
| 适用于大多数蛋白质样本 | 操作步骤较多，耗时较长 |
| 结果重复性好 | 需要严格控制实验条件 |
| 可用于粗提液或细胞裂解液中蛋白质的测定 | 不适合高浓度样品 |
三、Lowry法的操作流程简述
1. 准备标准蛋白溶液：通常使用牛血清白蛋白（BSA）作为标准品。
2. 加入双缩脲试剂：使蛋白质与铜离子结合。
3. 加入福林酚试剂：引发显色反应。
4. 静置显色：一般需要30分钟至1小时。
5. 测量吸光度：在750 nm波长下读取吸光值。
6. 绘制标准曲线：根据标准品的吸光度计算未知样品的蛋白质浓度。
四、适用范围与注意事项
- 适用范围：适用于大多数水溶性蛋白质的测定，尤其适合细胞裂解液、组织匀浆等复杂基质样本。
- 注意事项：
- 避免使用含有还原性物质（如DTT、β-巯基乙醇）的样品。
- 样本应充分混匀，避免沉淀影响结果。
- 实验过程中需保持温度恒定，避免温度波动影响显色反应。
五、总结
Lowry法是一种经典的蛋白质定量方法，具有较高的灵敏度和较好的重复性，广泛应用于科研和临床检测中。尽管其操作较为繁琐，但通过规范实验流程和合理控制干扰因素，可以有效提高检测的准确性和可靠性。对于需要精确测定蛋白质含量的研究项目，Lowry法仍是一个值得推荐的选择。
